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可利用靶点特异性的RNA将Cas9核酸酶带到基因组上的具体靶点

来源:未知作者:admin 更新时间:2018-06-01 13:27
》(2012年影响因子为32.44)于8月8日在线正式颁发了上海市调控生物学重点尝试室、华东师范大学生科院生命医学研究所刘明耀传授和李鼎力副教讲课题组的最新研究功效。基因敲除技术这是继本年6月该课题组在《》杂志颁发基因敲除小鼠新手艺后,再次在国际出名

  》(2012年影响因子为32.44)于8月8日在线正式颁发了上海市调控生物学重点尝试室、华东师范大学生科院生命医学研究所刘明耀传授和李鼎力副教讲课题组的最新研究功效。基因敲除技术这是继本年6月该课题组在《》杂志颁发基因敲除小鼠新手艺后,再次在国际出名生物期刊上报道课题组在基因敲除大鼠和小鼠手艺上所获得冲破和功效。

  CRISPR-Cas源自细菌和古细菌的免疫系统,可操纵靶点特同性的RNA将Cas9核酸酶带到基因组上的具体靶点,从而对特定基因位点进行切割导致突变。该课题组将该手艺使用到基因敲除小鼠和大鼠动物模子的建立之中。研究发觉:RNA打针的体例将CRISPR-Cas系统导入小鼠受精卵比DNA打针能更无效的在胚胎中发生定点突变;该方式无小鼠遗传品系的限制,可以或许对大片段的基因组DNA进行删除;同时打针针对分歧基因的RNA序列可以或许在统一只小鼠或大鼠中发生多个基因突变。此外,基因敲除技术课题组操纵CRISPR-Cas手艺建立的基因敲除大鼠模子与保守方式建立的统一基因(肥胖相关G卵白偶联受体Mc4R)突变大鼠具有分歧的表型。

  基因敲除动物模子不断以来是在活体动物上开展基因功能研究、寻找合适药物感化靶标的主要东西。但保守的基因敲除方式需要通过打靶载体建立、ES细胞筛选、嵌合体小鼠选育等一系列步调,不只流程繁琐、手艺要求很高,并且费用大、耗时较长,成功率遭到多方面要素的限制。刘明耀、李鼎力课题组不断努力于开辟基因敲除动物新手艺。其团队于本年6月在《Nucleic Acids Research》颁发了关于转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)的手艺论文,成为世界上最早操纵该手艺建立基因敲除小鼠的两个团队之一。

  CRISPR-Cas手艺是继锌指核酸酶(ZFN)、ES 细胞打靶和 TALEN 等手艺后可用于定点建立基因敲除大、小鼠动物的第四种方式,且无效率高、速度快、生殖系转移能力强及简单经济的特点,在动物模子建立的使用前景将很是广漠。目前该团队曾经操纵该项手艺为上海市打算生育研究所、上海市东方病院、上海交大和复旦大学等科研单元和医药公司供给了多项动物模子建立办事。

  该论文的第一作者为李鼎力副传授和邱中伟博士研究生,同时参与本项研究的单元还有广西医科大学。本研究工作获得了国度科技部、教育部、国度天然科学基金委以及上海市科委的经费支撑。

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